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用這個方法來操作昆蟲elisa檢測試劑盒效果更好哦!

發(fā)布時間:2019-08-15   點擊次數:2109次
  昆蟲elisa檢測試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被昆蟲捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的昆蟲呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
 
  昆蟲elisa檢測試劑盒的操作流程:
  1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。
  3、樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
  4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次。
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
  昆蟲elisa檢測試劑盒的注意事項:
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
  2、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
  3、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
  4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  5、底物請避光保存。
  6、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
  7、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
  8、本試劑不同批號組分不得混用。
  10、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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